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志贺氏血清的相关程序步骤点击次数:933 更新时间:2017-09-25

   志贺氏血清用志贺氏菌属的代表菌株制成灭活菌抗原分别或混合免疫家兔所得的血清,经吸收出去非特异性凝集素后制成,通过凝集试验原理诊断各型志贺氏菌。
    1、将诊断血清于冰箱取出后平衡至室温。 
    2、选择符合志贺氏菌属培养特性,并经初步生化检测符合志贺菌属生物特性的疑似菌落。 
    3、菌群分析 
    将经18~24h血平板上纯培养的待检菌,分别用志贺氏菌属4种多价血清做玻片凝集试验,凝集阳性时,再分别用群多价血清做玻片凝集试验,群多价血清凝集阳性时,再分别与相应的单价血清做玻片凝集试验,zui终确定其血清分型。如果志贺氏菌属4种多价血清做玻片凝集试验均为阴性,可能有以下3种可能性:①K抗原的存在,处理方法:取待检菌的纯菌落于生理盐水中制成浓度约2麦氏单位的菌悬液,置于100°C水浴中煮沸30min,泠却至室温后再用诊断血清进行玻片凝集试验;②非典型菌落,处理方法:通过在营养琼脂平板上的传代让其恢复抗原性,再用诊断血清进行玻片凝集试验;③诊断血清型以外的可送市或省CDC检测。 
    4、玻片凝集试验法取18~24h血平板上纯培养的待检菌,用生理盐水制成2麦氏单位的菌悬液,取诊断血清20μL于洁净玻片上,然后取20μL待检菌悬液与血清混匀,轻轻摇动玻片,1min内呈现明显凝集者为阳性,呈均匀浑浊者为阴性,每次凝集试验均应以生理盐水作为阴性对照试验。若与福氏志贺氏菌单价血清呈现凝集可参照福氏志贺氏菌诊断抗原表(见附表)及生化特性做菌型诊断。 
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