基孔肯雅热试剂的试验步骤点击次数:880 更新时间:2017-10-18
基孔肯雅热的特征是突然发热,经常伴有关节痛。其他常见症状还包括肌肉疼痛、头痛、恶心、疲劳和皮疹。关节疼痛通常使患者极为虚弱,但往往持续数天或延长至数周。因此,该病毒可引起急性、亚急性或慢性疾病。在开始试验前,请仔细阅读试验说明。结果的可信度是依赖于严格地按照实验说明来进行的,铺板时zui少留1个孔为空白对照(A1)1个阴性质控孔(B1)2个临界质控孔(C1+D1)1个阳性质控孔(E1)。开始试验前,请将所有试剂都平衡到室温
1.吸取50μL的质控品和稀释过的样本到相应的孔中,留A1孔做空白对照孔;
2.封板;
3.在37±1℃下孵育1小时±5分钟;
4.当孵育完成时,揭去封板片,弃去反应液,每孔300μL洗涤液,洗板3次,避免溢出。每孔浸泡的时间都必须>5秒,zui后拍板将残留的液滴都拍去。
5.吸取50μL基孔肯雅溶液1到除了空白对照孔的每个孔中,盖板;
6.在室温孵育30分钟;
7.重复步骤4;
8.将基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素结合物混匀10分钟;
9.吸取50μL基孔肯雅溶液2跟链霉亲和素的复合物到除了空白对照孔的每个孔中,盖板。
10.室温孵育30分钟 ;
11.重复步骤4;
12.吸取100μLTMB底物液到每个孔中;
13.避光孵育15分钟();
14.加入100μL终止液到每个孔中,与加TMB底物液时的间隔和顺序都必须一样;
15.用酶标仪在加入终止液后30分钟内与450/620nm处检测。