犬粪包虫抗原检测试剂盒-使用说明书

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【原理】

 本试剂采用ELISA方法用于犬粪便中包虫抗原的检测。

【试剂组成】

【操作程序】

1.  样品处理   犬粪样品需要预先低温（-70℃以下）冷冻7天以上，以灭活虫卵。称取1克犬粪,加入1ml已稀释的粪便处理液，充分搅拌混匀，静置10分钟，再经5000rpm离心30分钟，取上清液检验。

2.  洗涤液配制  用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液（2号液）按1：10稀释，如取50ml浓缩液与450ml蒸馏水或去离子水充分混匀即为工作洗涤液。

3.  加样反应   每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔；其中阴、阳对照孔分别加入阴性、阳性对照各100ul，空白对照孔加入样品稀释液（5号液）2滴。其它各样本检测孔先滴加样品稀释液（5号液）各1滴，再取犬粪上清液50ul加入板孔中。37℃下避光反应30分钟，甩去孔内液体。用已稀释的洗涤液洗涤4次，每次静止1分钟，拍干。

4.  加酶反应   除空白孔外，各孔加酶结合物2滴。37℃下避光反应30分钟，甩去孔内液体。用已稀释的洗涤液 洗涤3次，每次静止1分钟，拍干。

5.  显色反应   加底物液（3号液）和显色剂（4号液）各1滴，混匀，37℃避光显色10分钟。加终止液（6号液）1滴，终止反应（加终止液后，蓝色会变为黄色）并判读结果。

【结果判断】

       阴性对照呈无色或浅黄色，阳性对照呈明显黄色，表示试验有效。

       以空白对照调零，用酶标仪于450nm（630nm作参比波长）读取吸光度（A值）。待检孔A值大于阴性对照A值平均值的3.1倍者判为阳性。如阴性对照A值的平均值低于0.10时按0.10计算。

【注意事项】

1.试剂盒于2-8℃保存，有效期12个月。每次使用前应先平衡至室温。

2.未使用完的板条应密封保存。

3.试剂盒中终止液具有腐蚀性，要小心使用。

4.瓶盖每次使用后要拧紧，各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组分不可混用。

5.应采集新鲜的犬粪样本进行测试。若不能及时检测，应将粪样放置低温冻存，防止腐败或反复冻融。如犬粪难以溶解，应适当捣碎处理。任何样本都应作为传染源来处理。

6.37℃孵育时，建议使用水浴箱。如无条件，可使用湿盒放入温箱并同时用不干胶膜封盖板孔。

7.浓缩洗涤液及浓缩粪便处理液若出现结晶时，应置37℃至溶解。

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什么是包虫病?

包虫病（hydatidosis, hydatid disease），又称棘球蚴病，是细粒棘球绦虫的幼虫感染人体所致的疾病。该病为人畜共患病。狗为终宿主，羊、牛是中间宿主；人因误食虫卵成为中间宿主而患包虫病。