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伪狂犬病毒抗体检?测试剂盒

伪狂犬病毒抗体检?测试剂盒

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  • 产品描述

伪狂犬病毒抗体检测试剂盒说明书

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【原理】

       猪伪狂犬是由伪狂犬病毒(Pseudorabies virus, PRV)引起的家畜和多种野生动物发生一种急性传染病。该病以发热、奇痒、呼吸和神经系统疾病为主要特征?;疾《锊∷缆矢?,但成年猪死亡率低,也不发生奇痒,妊娠母猪可导致流产、产死胎和木乃伊胎,新生仔猪和断奶仔猪死亡率较高。检测特异性抗猪伪狂犬病毒抗体,可作为猪场伪狂犬疫苗的免疫监测及该病辅助检测指标。

        本试剂盒采用ELISA方法检测猪血清中特异性抗伪狂犬病毒IgG抗体。本试剂灵敏度高,特异性强,重复性好,操作方便快速,可分多次使用。

【试剂组成】

1.预包被板

48T/96T;

 

7. 终止液(6号液)

1支;

2.酶结合物(1号液)

1支;

 

8. 阳性对照品

1支;

3.浓缩洗涤液(2号液)

1支;

 

9. 阴性对照品

1支;

4.底物(3号液)

1支;

 

10.不干胶膜

1/2片;

5.显色剂(4号液)

1支;

 

11.自封袋

1个;

6.样本稀释液(5号液)

1支;

 

12.使用说明书

1份;

【操作程序】

1.洗涤液配制 用蒸馏水或去离子水将浓缩洗涤液(2号液)按1:10稀释,如取50ml浓缩液与450ml蒸馏水或去离子水充分混匀即为工作洗涤液。

2.样本稀释   用样本稀释液(5号液)将待检血清样本按1:100稀释,如取5ul样本与495ul样本稀释液,混匀。阴性、阳性对照品不用稀释,直接加样。

3.加样反应   每次试验设阴性对照2孔、阳性及空白对照各1孔(分别加入阴性、阳性对照及样本稀释液100ul)。样本检测孔每孔加已稀释血清样本100ul。37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,每孔注满工作洗涤液洗涤3次,每次均需停留1分钟后再甩净,拍干。

4. 加酶反应   除空白对照孔外,每孔加酶结合物(1号液) 1滴。37℃避光反应30分钟后,甩去孔内液体,如上洗涤,拍干。

5.显色反应   加底物液(3号液)和显色剂(4号液)各1滴,混匀,37℃避光显色10分钟。加终止液(6号液)1滴,终止反应(加终止液后,蓝色会变为黄色)并判读结果。

【结果判断】

        阴性对照呈无色或浅黄色,阳性对照呈明显黄色,表示试验有效。

        以空白对照调零,用酶标仪于450nm(630nm作参比波长)读取吸光度(A值)。待检孔A值大于阴性对照A值平均值的2.1倍者判为阳性。如阴性对照A值的平均值低于0.08时按0.08计算。

【注意事项】

       1.试剂盒于2-8℃保存,有效期12个月。每次使用前应先平衡至室温。

       2.未使用完的板条应密封保存。

       3.试剂盒中终止液具有腐蚀性,要小心使用。

       4.瓶盖每次使用后要拧紧,各瓶盖之间不可混用。不同批号试剂盒的试剂组份不可混用。

       5.试验样本应为无染菌、无血脂、无溶血的血清。任何样本都应视为传染源妥善处理。

       6. 37℃孵育时,建议使用水浴箱。如无条件,可在温箱中放置湿盒进行反应并同时用不干胶膜封盖板孔。

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