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诺如病抗原快速血清检测试剂

诺如病抗原快速血清检测试剂

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诺如病毒抗原快速检测试剂卡

  • 产品描述

诺如病毒抗原快速检测试剂卡(免疫层析法)说明书

【包装规格】

20 测试/盒

【预期用途】

用于体外诊断。诺如病毒抗原快速检测试剂卡(免疫层析法)是用免疫层析的方法快速定性

测定人粪便样本中,基因1型(GGI)和基因2型(GGII)的诺如病毒。该试剂可以协助诊断胃肠

炎,分析有疑似诺如病毒胃肠炎症状的儿童和成人的粪便样本。

【检验原理】

诺如病毒抗原快速检测试剂卡(免疫层析法)为快速、多步法侧流免疫层析检测,应用了抗

诺如病毒抗原的单克隆抗体。在加样孔旁的反应窗内,有两条包被了固定抗体的平行线。检测线(T)包含了抗诺如病毒抗原的抗体。质控线C包含了抗鼠IgG的抗体。酶标记物1包含了生物素化的抗诺如病毒抗原的抗体,酶标记物2是由结合了辣根过氧化物酶的链霉菌抗生物素蛋白组成。检测过程中,先从已经准备好的粪便样本悬浊液中,吸取一定量的上清液,与一定量的酶标记物1混合,加入检测卡较小的窗口中(加样孔)。经过室温下10 分钟的孵育后,样本和酶标记物混合液被检测膜吸收,并在过滤片上移动。在这个过程中,诺如病毒阳性标本中的抗原-酶标记物复合物,与检测线上固定的抗诺如病毒抗体结合,没有结合抗原的生物素化的抗体则结合在质控线上。之后加入酶标记物2,在室温下孵育1 分钟,结合了过氧化物酶的链霉菌抗生物素,与通过特异性抗体而固定在膜上的生物素结合。

在反应窗加入洗液,洗掉没有结合的过氧化物酶。如果测试为诺如病毒阳性,加入底物后三

分钟,在检测线(T)上就会出现蓝线,同时质控线(C)上也会出现蓝线。如果质控线没有变蓝,说明这次检测的操作存在问题,结果不可以用于诊断。


【主要组成成分】

试剂盒内的试剂足够进行20次检测

测试卡 Cassette 20次检测 内装20个独立包装的测试卡

稀释缓冲液 Diluent 30 ml 样本稀释缓冲液,氯化钠蛋白缓冲液,含0.1% Kathon CG;

开瓶即用,蓝色洗液 Wash 10ml 洗液,磷酸化的氯化钠,含0.1% Thimerosal,开瓶即用

酶标记物1 Conjugate│1 7ml 稳定蛋白溶液中的生物素标记的抗诺如病毒抗体,开瓶即用,

酶标记物2 Conjugate│2 5ml 稳定蛋白溶液中的链霉菌过氧化物酶,开瓶即用

底物 Substrate 7ml 过氧化氢/TMB,开瓶即用吸液管 Pipet 25支 每包中装有25支有刻度标记的一次性塑料吸样管


【储存条件及有效期】

2-8 °C保存,必须在有效期前使用。过有效期之后,产品的质量保证不再有效。同样,如果检测卡的外壳破损将会使检测卡潮湿,我们将不能保证检测卡适合使用。

有效期:6个月

【样本要求】

粪便样本必须使用没有任何添加剂的干净容器收集,试验前储存于温度应为2-8 °C。在病人症状出现后(腹泻和呕吐),应尽快进行样本采集,因为症状出现后1-3 天,病毒的清除达到zui大化。如果标本保存时间超过3 天,必须储存于-20 °C。在实验开始前,冷冻的样本必须充分解冻,回复至室温。与新鲜样本一样,复温的样本也必须在检测前,和试剂充混合。应避免样本多次冻融。

采用直肠拭子采集样本时,必须得到足够的粪便样本(大约100 mg)以确保检测进行。

【检测方法】

1.常规信息

检测前,样本、稀释缓冲液、试剂和检测卡必须恢复至室温(20 - 25 °C)。检测卡必须在即将使用前才可以从外包装中取出,检测卡一旦从外包装中取出或被使用,则不可以再次使用。检测不可以在阳光直射下进行。


2.准备样本悬浊液

取1 ml样本稀释缓冲液Diluent 加入贴好标签的试管内。对于液态粪便样本,可用盒内的一次性吸液管Pipet 吸取100 μl样本(至吸液管的第二个增粗处),悬空滴加于事先已加入提取缓冲液的标记试管中;对于固态粪便样本,取50-100mg样本(豌豆大小)加入缓冲液中。样本必须被混匀,可利用试管反复吸放,或者用漩涡混匀器将粪便悬浮液混匀。至少沉淀2分钟后,取200- 500 μl上清液置于另一干净试管中(或者未包被的微孔中)。


3.将检测卡Cassette从外包装中取出,将其放置在水平的垫子上。

4.用已经处理过同一样本的一次性吸管,从粪便悬浊液中吸取250 μl上清液(*个标记处),

加入干净的、标记的试管中。

5.在试管中加入6 滴酶标记物1 Conjugate│1(滴加时保持小瓶垂直)。

6.通过吸放的方式将混合液*混匀后,用一次性吸管将其全部吸出,以缓慢平稳连贯的水流,注入检测卡的加样孔中。将吸管倾斜约 45°},管口指向反应窗,这样混合物就可以全部流至反应窗内。__

7.将检测卡在室温下(20 - 25 °C)孵育10 分钟。确保反应窗的检测膜已被样本混合液充分浸湿,否则请将100 μl 稀释缓冲液滴入加样孔中。

8.在反应窗中加入4 滴酶标记物2 Conjugate│2(滴加时保持小瓶垂直),再于室温下孵育至少1分钟。

9.在反应窗中,加入10滴洗液 Wash,待洗液被*吸收后,再进行后续操作。

10.在反应窗中加入6 滴底物 Substrate(滴加时保持小瓶垂直)。

11.之后的3分钟内,读出检测结果。在3分钟后出现的有色条带,没有诊断意义

【参考值(参考范围)及检验结果的解释】

1. 在加入底物后3 分钟之内,在良好采光直视下读出的检测结果,是zui可靠的。

2. 查看在反应窗的“C"标记处,是否有出现蓝色的条带(所谓的内部质控线),在反应窗的“T"标记处是否出现蓝色的条带(所谓的检测线)。颜色的强度可能会由浅变深。

3. 阳性结果:加入底物之后3 分钟内,如果同时出现两条蓝色的条带(检测线“T"和质控线“C"),可判别为阳性结果。颜色可由浅变深。如果条带只有部分清晰出现,也可以解释为阳性。膜的其他颜色改变或其他部位的阴影,都不能解释为阳性结果。

4. 阴性结果:加入底物的3 分钟后,就可以开始判别是否为阴性结果或无效结果了。如果只在反应窗的质控带“C"处出现蓝色的条带,在检测带“T"处没有蓝色条带出现,则可判定为阴性结果。阴性结果说明,在样本中没有诺如病毒的抗原存在,或抗原的量低于检测限。

5. 无效结果:在反应窗的检测带“T"和质控带“C"处,均无蓝色条带出现,或者只在检测带

“T"出现条带,这两种情况均说明检测无效,需要用新的检测卡重新进行检测。

诺如病毒抗原快速检测卡(免疫层析法)检测结果的解释:

【检验方法的局限性】

诺如病毒抗原快速检测试剂卡(免疫层析法)用于检测基因1 型和基因2 型的诺如病毒,如

果病毒量没有低于试剂的检测限,则可以检测该种病毒是否在粪便样本中出现。粪便样本是否取样于胃肠炎病人的症状表现期,对结果的影响是非常重要的。检测中出现蓝色条带的颜色强度,不能反应临床症状的严重程度,只能提示粪便样本中的病毒抗原量。条带的蓝色可以从很浅的颜色变为很深的颜色。

阳性结果不能排除存在其他病原体感染。在样本中可能同时存在两种及以上的病原体,需要

进行鉴别的检测以确诊。双重或多重感染的症状会比一种感染引起的症状严重。

阴性结果不能排除诺如病毒的存在或诺如病毒是引发胃肠炎的原因。此种情况可因以下原

因发生:间歇性病毒排出、或者粪便样本中病毒含量过低,样本采集时间不当,运输或储存条件

不适合。如果病人高度怀疑病原体感染,应再重新留便复查。

【产品性能指标】

在验证实验中,用诺如病毒抗原快速检测试剂卡(免疫层析法)检测113 例粪便样本。样本

从胃肠炎患者的粪便中采集,既有散发病例,也有爆发病例。样本收集于2007-2008 年的冬季,在德国汉堡的城市地区采集。在当地的卫生研究所,用RT-PCR 的方法检测新鲜的样本后,将样本冻存。2008 年7 月,将冰冻的样本融化后,在与之前相同的实验室,用诺如病毒抗原快速检测试剂卡(免疫层析法)和已上市的诺如病毒抗原检测试剂盒(酶联免疫法),同时进行检测。

【注意事项】

1. 仅用于体外诊断。

2. 实验必须由经过专业培训的人员操作。必须严格按照医学实验室的规章制度操作。

3. 产品操作时必须严格按照说明书操作。

4. 样品稀释缓冲液中含有Kathon CG 作为防腐剂,此物质不能接触皮肤或粘膜。

5. 样本和试剂不可以用嘴吸取。

6. 样本和试剂避免接触受伤的皮肤或者粘膜。

7. 处理样本时应该戴一次性手套,完成试验后要洗手。

8. 禁止在样本和试剂实验区域内吸烟、吃东西或喝水。

9. 所有试剂和材料如果接触有潜在感染性的样本,应与样本一样,立即用适当的消毒剂(如:

次氯酸钠)或者高压高温121℃至少1 小时处理。

10. 诺如病毒抗原快速检测试剂卡(免疫层析法)必须在效期内使用。所有的试剂都被调整

为zui适宜的活性状态。稀释或改变这些试剂将减少其活性。如果不按照说明中的时

间和温度进行操作,将会导致错误的结果。

11. 不同批号的诺如病毒抗原快速检测试剂卡(免疫层析法)试剂盒中的试剂不可以混用。

12. 试剂和样本必须避免微生物的污染,否则将会影响检测结果。

13. 吸取每个样本时,必须使用不同的吸管,以防止交叉污染及错误结果

14. 每个检测卡只可使用一次

【公司名称】 广州健仑生物科技有限公司

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