黄热病毒IgG抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）

使用说明书

 [产品名称]

通用名称：黄热病毒IgG抗体诊断试剂盒（酶联免疫法）

英文名称：Diagnostic Kit for Yellow fever virus IgG antibody（ELISA）

[包装规格]

   96人份/盒

[用途]

黄热病毒（YFV）IgG抗体诊断试剂盒适用于定性测定人血清或血浆中黄热病毒IgG抗体，可作为黄热病毒早期感染的临床诊断指标之一。

[检验原理]

本试剂盒采用双抗体夹心法，在预包被鼠源单抗-黄热病毒特异性抗原复合物的反应孔内加入待测标本，若标本中有抗CHIV，则可在微孔板表面形成抗原-抗体复合物，再与酶标二抗结合，形成抗原-抗体-酶标二抗复合物，经显色系统显色后，根据OD值判定有无YFV抗体的存在。

 [试剂盒组成]

1. 预包被反应板                96孔×1块
2. 酶结合物                    6ml×1瓶
3. YFV阴性对照              0.5ml×1瓶
4. YFV阳性对照              0.5ml×1瓶
5. 浓缩洗涤液                 30ml×1瓶
6. 样品稀释液                 30ml×1瓶
7. 显色剂A、B液             各6ml×1瓶
8. 终止液（2M H2SO4）        5ml×1瓶
9. 说明书                     1份

[储存条件及有效期]

试剂盒应置2-8℃中避光保存，有效期12个月。

[适用仪器]

1. 微量移液器和洁净的吸头
2. 37℃恒温箱或水浴锅
3. 计时器
4. 洗板机
5. 振动器
6. 酶标仪 检测波长450nm，参考波长630nm。

[样本要求]

1. 样本采集不需要特殊准备，按照正常的采血技术收集血液，全血标本先放置37℃处理2小时，3000转/分钟离心10分钟以上，使血清（浆）不含或极少含血细胞。如果为抗凝血样本，样本离心后，再室温放置2小时以上。
2. 样品可以使用血清或者血浆，柠檬酸，肝素或EDTA等抗凝剂不会影响实验结果。
3. 样品中含用叠氮钠会影响实验的结果，高度溶血的样品、没有*收缩的血清样品或者有微生物污染的样品可能会引起错误结果。
4. 新鲜的样品在2-8℃无菌条件可保存一个星期，新鲜样品可长期贮存-20℃或以下，避免反复冻融。

[检验方法]

1. 从冷藏环境中取出试剂盒，在室温下平衡30分钟，同样将浓缩洗涤液做1:20稀释。
2. 待测样本用样本稀释液1:1000稀释，每孔加入100μl，并设阴性对照、阳性对照各2孔，分别加入阴、阳性对照100μl，再设空白对照1孔，置37℃温浴60分钟，弃去孔内样本，拍干。
3. 洗板：

1. 手工洗板：弃去反应板条孔内液体，在吸水纸上拍干；用洗涤液注满每孔，勿溢出，静置5-10秒，弃去孔内洗涤液拍干，如此反复5次，拍干。
2. 洗板机洗板：选择洗涤5次的程序洗板，洗液盈注满每孔，并确保每次吸净无残留，zui后在吸水纸上拍干。

1. 每孔加酶结合物100μl，空白对照孔不加，贴上胶纸，置37℃孵育30分钟，同上洗板5次。
2. 每孔加显色剂A液、B液各50μl，轻轻振荡后，置37℃避光孵育15分钟。
3. 每孔加入终止液50μl终止反应，空白调零，在酶标仪中读取各孔OD值（450nm/630nm）。

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