ELISA IgG 单疱疹2酶免ELISA试剂盒 FOCUS

ELISA IgG 单疱疹2酶免ELISA试剂盒 FOCUS

HSV is a caused by herpes simplex virus viral skin diseases, Chinese medicine called herpes simplex. It can cause many kinds of human diseases, such as gingivitis (gingivostomatitis), keratoconjunctivitis (keratoconjunctivitis), encephalitis (encephalitis), reproductive system infection and neonatal infection.

单纯疱疹是一种由单纯疱疹病毒所致的病毒性皮肤病，中医称为热疮。能引起人类多种疾病，如龈口炎（gingivostomatitis）、角膜结膜炎（keratoconjunctivitis）、脑炎（encephalitis）以及生殖系统感染和新生儿的感染。

ELISA IgG  单疱疹2酶免ELISA试剂盒 FOCUS

一、 试剂盒组成

1、抗原板，96 孔（直接使用）

2、IgG 酶结合物，16ml（直接使用）

3、IgG 强阳性质控，0.3 ml（用时稀释液稀释 1：101=10μl +1ml 稀释液）

4、IgG 弱阳性质控，0.3 ml（用时稀释液稀释 1：101=10μl +1ml 稀释液）

5、阴性质控，0.3 ml（用时稀释液稀释 1：101=10μl +1ml 稀释液）

6、IgG Cut-Off 校准物，0.3 ml（用时稀释液稀释 1：101=10μl +1ml 稀释液）

7、标本稀释液，100 ml（直接使用）

8、10 倍浓缩的洗涤缓冲液，100 ml（用时用蒸馏水稀释成 1 倍）

9、底物试剂，16 ml（直接使用，如果试剂出现暗蓝色说明已被过氧化物酶污染，换用新批号试剂）

10、终止液，16 ml（直接使用）

11、透明胶贴, 2 片（直接使用）

二、试剂有效期及处理

1、试剂盒应贮存于 2-8℃，盒内组成试剂未启封，可稳定至标签上注明的有效期。

2、不要使用超过有效期的试剂盒。

3、贮存及孵育时，不要将试剂暴露在强光下。

4、试剂使用前，应恢复至室温。

三、标本收集和准备

使用血清标本进行测试，其它标本的兼容性未作评估。高脂血、热-灭活处理、溶血或污染的血清

可造成错误结果，因此，避免使用上述不合格标本。

1、 标本收集和准备：分离血清置无菌密封容器，22℃可放置 8 小时，2-8℃可保存 48 小时，更长时间的保存应将标本冻存于-20℃或更冷的环境。使用前，血清应充分融化并混匀。

2、 标本、质控和校准物处理：标本、质控和校准物作 1：101 稀释，即 10μl 血清（质控或校准物）+1ml 标本稀释液。

四、操作步骤

1、使用前，将试剂盒恢复至室温。

2、用 1 倍的洗涤缓冲液充满各孔，室温浸泡 5 分钟，弃去液体，在吸水纸上拍打至吸干液体。

3、加入 100μl 标本稀释液到空白孔，加入 100μl 已稀释的标本、质控物、校准物（见上述标本、质控和校准物准备）到各对应的孔中。（如果测试超过 48 孔，建议使用 8-12 道加样器）。

4、用胶贴封盖抗原板，室温 20-25℃ 孵育 60±1 分钟。

5、撕去胶贴，倒空孔中液体。

6、用 1 倍洗液缓缓充满每孔，然后倒空孔中液体。

7、重复按步骤 6 洗涤 2 次。

8、轻轻扣去孔中液体，并使板面倒置向下，在吸水纸上扣去残留 1 倍洗液。

9、移取 100μl IgG 酶结合物到每个孔中。

10、用胶贴覆盖板室温 20-25℃ 孵育 30±1 分钟。

11、重复步骤 5 至 8。

12、移取 100μl 底物试剂到各孔中，开始孵育，时间从加入*孔开始计算，决不能混用与酶结合物相同的槽子装底物液（使用 8-12 道加样器时）。

13、室温 20-25℃ 孵育 10±1 分钟。

14、加入 100μl 终止液到每孔中，终止反应。按加入底物液一样的次序和间隔加入终止液。抗体阳性的孔，其颜色由蓝色变为黄色。

15、用吸水纸轻轻擦去孔底水滴，以免影响读取 OD 值。

16、在加入终止液 1 小时内读取吸光度。使用 450nm 波长，用空白孔调零。

五、质量控制

每做一次测试（每块抗原板中的试条和反应孔）都必须包括 Cut-off 校准物和所有 3 个质控。如果同时做几个抗原板，则每块板都必须包括 1 个校准物和 3 个质控。在操作者熟悉试剂的性能之前，推荐每份标本、校准物、质控必须复孔测试，则 Cut-off 校准物为 4 孔，至少还必须设置 1 个空白孔（只含标本稀释液）用于仪器的校正。

Cut-off 校准物已被公式化，以合适区分阴性和阳性血清。虽然其吸光值可以因每次测试或实验室不同而改变，但其平均值应在 0.100 至 0.700 OD 单位以内。每个重复测试的 Cut-off 校准物 OD 值，应在平均值上下 0.10 以内。

结果报告以相比 Cut-off 校准物的指示值形式表示。指示值的计算为标本的 OD 值除以 Cut-off 校准物平均 OD 值。

1、强阳性质控指示值应大于 3.5。

2、弱阳性质控指示值应处于 1.5-3.5 之间。

3、阴性质控指示值应小于 0.8。

如果校准物和质控指示值没有落在这些参数范围里，患者的测试结果应视为不可靠，试验应重做。

阳性和阴性质控用于监控试剂质量是否失效。阳性质控不能用于 Cut-off 精确度的指示，仅用于确认试剂的功能。

六、试验结果的解释

以相比 Cut-off 校准物指示值的方式报告病人的结果。

指示值计算 = 标本 OD 值÷Cut-off 平均值

>1.10 阳性

<0.90 阴性

≥0.90 和≤1.10 可疑

对可疑的标本，应重新进行测试，如果重新试验后的结果仍为可疑，要求 4-12 周后重新抽血进行试验，或者标本用另外的方法如蛋白印迹法进行测试。

更多详细说明及原版英文说明书请工作人员。

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