小菌落脑膜炎奈瑟菌诊断血清

广州健仑生物科技有限公司

【储藏条件】

2~8℃避光保存，在标明的有效期内使用。

【有效期】

24个月

【产品名称】

通用名：脑膜炎奈瑟菌诊断血清英文名：antisera for N.meningitidis

【产品说明】

本套血清用于A、B、C、W、X、Y等6个常见血清QUN（serogroup）脑膜炎奈瑟菌的血清群鉴定，将相应血清群脑膜炎奈瑟菌制备灭活抗原，免疫家兔所得，血清产品经免疫吸附去除了非特异性凝集成分，具有效价高，特异性强的特点。

小菌落脑膜炎奈瑟菌诊断血清

【规格】

每种血清群1瓶，每瓶2ml，均为使用液。

【使用方法】

1.产品在使用前，由冰箱拿出，恢复温度到室温后使用。

2.样品分离培养物，经镜检和生化鉴定，确定为脑膜炎奈瑟菌后，再进行血清分群检测，如果未能确定为脑膜炎奈瑟菌，不宜直接进行血清凝集检测，以免产生假阳性结果。

3.待鉴定细菌在血平板或巧克力平板上，5% CO₂，培养48小时。

4.用酒精擦拭玻璃片。

5.用蜡笔或防水笔将玻璃片分为8个方格。

6. 在玻片每个方格的下半部分，用移液器加5%的福尔马林溶液（基于生物安全目的）。

7. 用无菌或一次性10μl接种环挑取BAP平板上过夜培养的细菌菌落。

8. 在玻片上将细菌与5%的福尔马林溶液混匀，混匀后的液体应该不透明，在加抗血清前应保持细菌悬液不干燥。

9. 在玻片的上方加10μl血清群特异的抗血清，同时在阴性对照侧加BS或者生理盐水。

10. 缓慢的混合细菌悬液和抗血清，使上部的抗血清和下部的细菌悬液充分混合1-2分钟。不要做旋转晃动，以免不同血清群的血清会相互混合污染。

11.在灯光下，黑暗背景条件下观察结果。1-2分钟内呈2+及以上凝集现象为阳性，1-2分钟内呈现2+以下凝集现象为阴性。如果过了2分钟，才发生的凝集反应按阴性处理。

【凝集反应的强度等级】

当抗血清与细菌接触，会引起凝集反应，使细胞（细菌）凝集或呈簇，细胞（细菌）上清液变得清亮，细胞悬液浓度或使用的抗血清浓度不同，会产生不同的强度的凝集反应，见图示

4+ 所有的细胞都发生凝集，细胞悬液清亮。

3+ 75%的细胞发生凝集，细胞上清略微浑浊不清。

2+ 50%的细胞发生凝集，细胞上清略微浑浊不清。

1+ 25%的细胞发生凝集，细胞上清略微浑浊不清。

+/- 少于25%的细胞发生凝集，可见有颗粒状的成分。

0 没有肉眼可见的凝集，上清悬液浑浊、平滑。

【血清群确定】

1. 1-2分钟内，出现3+或4+凝集为阳性反应（强阳性反应）。对于B群脑膜炎奈瑟菌来说，如果出现2+及以上的凝集则可认为阳性。

2. 阴性反应是+/-、1+ 或 2+（弱凝集）的凝集程度。

3. 当菌株仅与一种抗血清出现凝集，但和生理盐水不凝集时才能鉴定为该种血清型。

4. 如果不能确定血清群，菌株记为不能分群脑膜炎奈瑟菌（NG）。

5. 关于不能分群脑膜炎奈瑟菌（NG）菌株。

6. 在生理盐水中凝集，无论与任何抗血清发生强反应，都应标记为自凝菌。

7. 在生理盐水中不自凝，和多种血清出现凝集，记为NG。

8. 不和生理盐水凝集，也不和任何一个血清凝集也记作NG。

【结果难以判断时解决方案】

脑膜炎奈瑟菌具有可变性（有荚膜与无荚膜，小菌落与大菌落，慢生长与快生长，强凝集与弱凝集），有时候很难清除解释结果，一些建议如下：

1. 挑取同一平板上的另一个细菌克隆进行重复凝集试验。

2. 如果玻片上的结果不明确，将试管中配置悬液，重复该试验。

3. 加20µl抗血清直接涂于玻片上，直接加一环细菌进行混均凝集。

4. 再次培养，第二天进行重新试验。

5. 如果当天的平板上有各种大小不一的菌落，每种菌落再次分离纯培养，第二天每种菌落进行试验。大菌落一般会有比较好的凝集反应，小菌落次之。

6. 如果试验中的问题还是不能解决，应当和对照菌株同时进行试验，确保试剂的正确性。

【血清质量控制】

在对未知的菌落进行血清分群之前，应选用一套脑膜炎奈瑟菌参考菌株（A, B, C, W, X, Y）和一株可分群的脑膜炎奈瑟菌进行质量控制检测。操作步骤：

1. 新购进的每一批次抗血清要用参考菌株进行检测。

2. 半年后重复质量控制检测

3. 如果血清管暴露于超过4℃环境，或者怀疑血清被污染时，也要对血清进行重新的质量控制。

4. 关于血清分群和质量控制，每一批次的抗血清需要使用所有的参考菌株进行实验室验证，记录质量控制验证结果。

【血清质量控制检测结果判读】

1. 通过质量控制检测

与同源性的抗原反应，1-2分钟内，出现3+或 4+程度的凝集；单一血清群的抗血清不与其他血清群的脑膜炎奈瑟菌反应，不与NG菌株凝集反应，盐水不自凝。

2. 分群血清质量控制检测失败

如果抗血清与一种或多种参考菌株凝集反应，或/和NG参考菌株反应，盐水自凝，则血清不能使用。

【其他所需材料】

洁净玻片、生理盐水（0.85%的氯化钠溶液）、5%的福尔马林溶液、接种环或移液器。

【注意事项】

1. 本产品只能作为脑膜炎奈瑟菌血清型判定的辅助方法，zui终的判定需形态学、生化方法和血清学方法共同进行。

 2. 本产品应避免冷冻。反复冻融会使血清产生沉淀。

3. 本产品在保存过程中可能会产生浑浊或沉淀，这并不表示该产品已被污染。离心或者过膜去掉浑浊或沉淀后，可以正常使用。

4. 本产品含有0.1%*作为防腐剂，丢弃时需倒入下水管，并用大量的水冲洗下水管。

广州健仑生物公司提供SSI血清产品，包括沙门氏菌，志贺氏菌，大肠杆菌，肺炎链球菌，嗜血杆菌等。并且提供德国有名血清品牌SiFin的核心血清产品，德国SiFin血清质量好，实验*，已被各高校实验室，研究所列为推荐血清产品！详情可咨询工作人员！

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布氏杆菌是革兰氏阴性需氧杆菌。分类上为布氏杆菌属。本属细

菌为非抗酸性，无芽胞，无荚膜，无鞭毛，呈球杆状。组织涂片

或渗出液中常集结成团，且可见于细胞内，培养物中多单个排列

。布氏杆菌属有6个种，即牛种、羊种、猪种、绵羊种、犬种和细

菌鼠种，前5种感染家畜。布氏杆菌在土壤、水中和皮毛上能存活

几个月，一般消细菌能很快将其杀死。
诊断要点
由于发生流产的病因很多，而该病的流行特点，临床症状和病理

变化均无明显的特征，同时隐性感染较多，因此，确诊要依靠实

验诊断?
流行特点
母羊较公羊易感性高，性成熟后对本病极为易感。消化道是主要

感染途径，也可经配种感染，羊群一旦感染此病，主要表现是孕

羊流产，开始仅为少数，以后逐渐增多，严重时可达半数以上，

多数病羊流产1次。
临床症状
多数病例为隐性感染。怀孕羊发生流产是本病的主要症状，但不

是必有的症状。流产多发生在怀孕后的3-4个月，有时患病羊发生

关节炎和滑液囊炎而致跛行，公羊发生睾丸炎，少部分病羊发生

角膜炎和支气管炎。
病理变化
剖检常见的病变是胎衣部分或全部呈黄细菌胶样浸润，其中有部

分覆有纤维蛋白和脓液，胎衣增厚并有出血点。流产胎儿主要为

败血症病变，浆膜与黏膜有出血点与出血斑，皮下和肌肉间发生

浆液性浸润，脾脏和淋巴结肿大，肝脏中出现坏死灶。公羊得病

时，可发生化脓性坏死性睾丸炎和附睾炎，睾丸肿大，后期睾丸

萎缩。
实验诊断
主要根据病原学检查、血清学检查和细菌反应检查情况做出诊断。
Brucella is Gram-negative aerobic bacilli. The genus is Brucella. This is fine

Non-acid bacteria, non-spore, non-capsule, no flagella, were club-shaped. Tissue smear

Or exudate often gather into a group, and can be seen in the cells, the culture more than a single arrangement

. There are 6 species of brucellosis, namely cattle, sheep, pig breeds, sheep breeds, breeds and fine breeds

Fungus species, the first five kinds of infected livestock. Brucella can survive in soil, water and fur

A few months, the general elimination of bacteria can kill it quickly.
Diagnostic points
Due to the many causes of miscarriage, and the prevalence of the disease, clinical symptoms and pathology

No obvious changes in the characteristics of the same time, more hidden infections, therefore, confirmed to rely on real

Diagnostic test?
Popular features
Ewes more susceptible than the ram, sexual maturity is extremely susceptible to the disease. The digestive tract is the main

Infection, but also by breeding, flock once infected with the disease, the main performance is pregnant

Sheep abortion, only a few start, gradually increased after more than half of serious cases,

Abortion of most sick sheep 1.
Clinical symptoms
Most cases of latent infection. Abortion in pregnant sheep is a major symptom of the disease, but not

Is a must have symptoms. Abortion occurred in 3-4 months after pregnancy, and sometimes sick sheep

Arthritis and synovitis caused by limp, ram orchitis, a small part of the sick sheep

Keratitis and bronchitis.
Pathological changes
Common necropsy lesions are part or all of the yellow carcase gel-like infiltration, which have ministry

Fibrin and pus covered with fiber, thickening of the child and bleeding points. Abortion fetus is mainly

Sepsis lesions, serosa and mucosa bleeding and bleeding spots, subcutaneous and intramuscular occurred

Serous infiltration, spleen and lymph nodes, necrotic lesions in the liver. The ram gets sick

When purulent necrotic orchitis and epididymitis can occur, testicular swelling, late testicular

Shrinkage.
Experimental diagnosis
Mainly based on etiological examination, serological examination and bacterial reaction to check the situation to make a diagnosis

.