可变性脑膜炎奈瑟菌诊断血清

广州健仑生物科技有限公司

【储藏条件】

2~8℃避光保存，在标明的有效期内使用。

【有效期】

24个月

【产品名称】

通用名：脑膜炎奈瑟菌诊断血清英文名：antisera for N.meningitidis

【产品说明】

本套血清用于A、B、C、W、X、Y等6个常见血清QUN（serogroup）脑膜炎奈瑟菌的血清群鉴定，将相应血清群脑膜炎奈瑟菌制备灭活抗原，免疫家兔所得，血清产品经免疫吸附去除了非特异性凝集成分，具有效价高，特异性强的特点。

可变性脑膜炎奈瑟菌诊断血清

【规格】

每种血清群1瓶，每瓶2ml，均为使用液。

【使用方法】

1.产品在使用前，由冰箱拿出，恢复温度到室温后使用。

2.样品分离培养物，经镜检和生化鉴定，确定为脑膜炎奈瑟菌后，再进行血清分群检测，如果未能确定为脑膜炎奈瑟菌，不宜直接进行血清凝集检测，以免产生假阳性结果。

3.待鉴定细菌在血平板或巧克力平板上，5% CO₂，培养48小时。

4.用酒精擦拭玻璃片。

5.用蜡笔或防水笔将玻璃片分为8个方格。

6. 在玻片每个方格的下半部分，用移液器加5%的福尔马林溶液（基于生物安全目的）。

7. 用无菌或一次性10μl接种环挑取BAP平板上过夜培养的细菌菌落。

8. 在玻片上将细菌与5%的福尔马林溶液混匀，混匀后的液体应该不透明，在加抗血清前应保持细菌悬液不干燥。

9. 在玻片的上方加10μl血清群特异的抗血清，同时在阴性对照侧加BS或者生理盐水。

10. 缓慢的混合细菌悬液和抗血清，使上部的抗血清和下部的细菌悬液充分混合1-2分钟。不要做旋转晃动，以免不同血清群的血清会相互混合污染。

11.在灯光下，黑暗背景条件下观察结果。1-2分钟内呈2+及以上凝集现象为阳性，1-2分钟内呈现2+以下凝集现象为阴性。如果过了2分钟，才发生的凝集反应按阴性处理。

【凝集反应的强度等级】

当抗血清与细菌接触，会引起凝集反应，使细胞（细菌）凝集或呈簇，细胞（细菌）上清液变得清亮，细胞悬液浓度或使用的抗血清浓度不同，会产生不同的强度的凝集反应，见图示

4+ 所有的细胞都发生凝集，细胞悬液清亮。

3+ 75%的细胞发生凝集，细胞上清略微浑浊不清。

2+ 50%的细胞发生凝集，细胞上清略微浑浊不清。

1+ 25%的细胞发生凝集，细胞上清略微浑浊不清。

+/- 少于25%的细胞发生凝集，可见有颗粒状的成分。

0 没有肉眼可见的凝集，上清悬液浑浊、平滑。

【血清群确定】

1. 1-2分钟内，出现3+或4+凝集为阳性反应（强阳性反应）。对于B群脑膜炎奈瑟菌来说，如果出现2+及以上的凝集则可认为阳性。

2. 阴性反应是+/-、1+ 或 2+（弱凝集）的凝集程度。

3. 当菌株仅与一种抗血清出现凝集，但和生理盐水不凝集时才能鉴定为该种血清型。

4. 如果不能确定血清群，菌株记为不能分群脑膜炎奈瑟菌（NG）。

5. 关于不能分群脑膜炎奈瑟菌（NG）菌株。

6. 在生理盐水中凝集，无论与任何抗血清发生强反应，都应标记为自凝菌。

7. 在生理盐水中不自凝，和多种血清出现凝集，记为NG。

8. 不和生理盐水凝集，也不和任何一个血清凝集也记作NG。

【结果难以判断时解决方案】

脑膜炎奈瑟菌具有可变性（有荚膜与无荚膜，小菌落与大菌落，慢生长与快生长，强凝集与弱凝集），有时候很难清除解释结果，一些建议如下：

1. 挑取同一平板上的另一个细菌克隆进行重复凝集试验。

2. 如果玻片上的结果不明确，将试管中配置悬液，重复该试验。

3. 加20µl抗血清直接涂于玻片上，直接加一环细菌进行混均凝集。

4. 再次培养，第二天进行重新试验。

5. 如果当天的平板上有各种大小不一的菌落，每种菌落再次分离纯培养，第二天每种菌落进行试验。大菌落一般会有比较好的凝集反应，小菌落次之。

6. 如果试验中的问题还是不能解决，应当和对照菌株同时进行试验，确保试剂的正确性。

【血清质量控制】

在对未知的菌落进行血清分群之前，应选用一套脑膜炎奈瑟菌参考菌株（A, B, C, W, X, Y）和一株可分群的脑膜炎奈瑟菌进行质量控制检测。操作步骤：

1. 新购进的每一批次抗血清要用参考菌株进行检测。

2. 半年后重复质量控制检测

3. 如果血清管暴露于超过4℃环境，或者怀疑血清被污染时，也要对血清进行重新的质量控制。

4. 关于血清分群和质量控制，每一批次的抗血清需要使用所有的参考菌株进行实验室验证，记录质量控制验证结果。

【血清质量控制检测结果判读】

1. 通过质量控制检测

与同源性的抗原反应，1-2分钟内，出现3+或 4+程度的凝集；单一血清群的抗血清不与其他血清群的脑膜炎奈瑟菌反应，不与NG菌株凝集反应，盐水不自凝。

2. 分群血清质量控制检测失败

如果抗血清与一种或多种参考菌株凝集反应，或/和NG参考菌株反应，盐水自凝，则血清不能使用。

【其他所需材料】

洁净玻片、生理盐水（0.85%的氯化钠溶液）、5%的福尔马林溶液、接种环或移液器。

【注意事项】

1. 本产品只能作为脑膜炎奈瑟菌血清型判定的辅助方法，zui终的判定需形态学、生化方法和血清学方法共同进行。

 2. 本产品应避免冷冻。反复冻融会使血清产生沉淀。

3. 本产品在保存过程中可能会产生浑浊或沉淀，这并不表示该产品已被污染。离心或者过膜去掉浑浊或沉淀后，可以正常使用。

4. 本产品含有0.1%*作为防腐剂，丢弃时需倒入下水管，并用大量的水冲洗下水管。

广州健仑生物公司提供SSI血清产品，包括沙门氏菌，志贺氏菌，大肠杆菌，肺炎链球菌，嗜血杆菌等。并且提供德国有名血清品牌SiFin的核心血清产品，德国SiFin血清质量好，实验*，已被各高校实验室，研究所列为推荐血清产品！详情可咨询工作人员！

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广州健仑生物长期供应各种违禁品检测试纸、违禁品检测卡、违禁品检测试剂盒、药筛试纸、药筛试剂盒、吗啡检测试剂盒、巴比妥检测试剂盒等。检测范围：吗啡、巴比妥、尼古丁、KET、mamp、MDMA、BZO、THC、MTD、BAR、MDMA、AMP、BUP、PCP、TCA、OXY、MET等等。

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该菌的感染力在抗体和血清补体存在下大大提高（但并非需

要两者存在）。该菌会因噬菌作用被伪足包裹进入巨噬细胞，之

后，菌体被细胞产生的自噬体包裹起来，这却阻止了溶酶体的溶

解。在这层保护之下，细菌大量繁殖。该菌利用一种型为IVB的分

泌系统分泌的名为Dot/Icm（细胞器运行缺失/细胞内繁殖）宿主

入侵效应蛋白。这些效应器可以提升细菌在宿主细胞的存活力。

该菌会在培养液里由II型分泌系统产生一种大小约为39kDa的金属

蛋白，这种蛋白对某些组织培养的细胞有毒害。II型分泌系统也

是*毒化作用的必需。[1]
1976年，美国宾夕法尼亚州的费城举办了一次退伍军人会议，参

加者中超过200人发生肺炎，其中34人遇难。经查明，这次事件的

元凶是一种当时尚未发现的细菌——嗜肺军团菌（该病也因此命

名为军团病）。这次事件反映了嗜肺军团菌并非小面积的人与人

的传染。
2004年，三种类型的嗜肺军团菌的基因序列已被成功测定，这为

从分子生物学层次了解嗜肺军团菌及军团菌属铺平道路。对180种

嗜肺军团属的DNA序列改变的基因比对检测证实了其基因具有高塑

性以及频繁的突变频率。更详细的有关其生活周期的资料是来自

于对生活在其自然宿主——卡氏棘阿米巴之中的嗜肺军团菌的基

因表达分布的研究。研究发现了嗜肺军团菌的生活周期分为两段

，而且深入研究了其可感染、可复制的特性。
1.    一般取下呼吸道分泌物、肺活检组织或胸前积液等标本

进行细菌学检查。
2.    用BCYE培养基分离细菌，再根据肺炎特性、菌落特征、

生化反应作出鉴定，但往往结果出现较晚。
现已发现嗜肺军团菌有15个血清型。其中，嗜肺军团菌血清1型（

Lp1）与人类疾病关系zui密切，其次为血清4型（Lp4）和6型

（Lp6）。关于血清凝集法用的诊断血清方面，推荐天津生物芯片

生产的嗜肺军团菌全套诊断血清产品。
3.    可将标本用一只荧光标记抗体进行直接荧光实验，既特

异又可做出快速诊断。

The bacterial infectivity is greatly increased (but not absoluy necessary) in the presence of antibodies and serum complement

Want both to exist). The bacteria will be pseudopodia due to phagocytic parcel into macrophages

After that, the cells are surrounded by autophagosomes that are produced by the cells, which prevent the lysosomal dissolution

solution. Under this layer of protection, bacteria multiply. The strain utilizes a fraction of IVB type

The secreted system is called Dot / Icm (organelle missing / intracellular reproductive) host

Invasive effect protein. These effectors increase the viability of bacteria in host cells.

The bacterium produces a size of about 39 kDa metal from the type II secretion system in the culture broth

Proteins, which are toxic to some tissue-cultured cells. Type II secretion system also

It is necessary for complete poisoning. [1]
In 1976, a veteran's conference was held in Philadelphia, Pennsylvania, United States

More than 200 people were pneumonia, of which 34 were killed. After investigation, this incident

The culprit is a kind of bacteria not found at that time - Legionella pneumophila (the disease is therefore life

Named Legionella). This incident reflects that Legionella pneumophila is not a small area of ??people and people

Infection.
In 2004, three types of Legionella pneumophila gene sequences have been successfully measured, which is

Understanding of Legionella pneumophila and Legionella from the molecular biology level Pave the way. Of 180 species

The gene alignment of the L. pneumophila gene sequence alignment confirmed that the gene is highly plasticized

Sexual and frequent mutation frequency. More detailed information about its life cycle comes from

Legionella pneumophila on living in its natural host, Amorpha

Study on the distribution of expression. The study found that Legionella pneumophila life cycle is divided into two sections

, But also in-depth study of its infectivity, replicable features.
1. General removal of respiratory secretions, lung biopsy or chest fluid and other specimens

Bacteriological examination.
2. With BCYE medium to separate bacteria, then according to pneumonia characteristics, colony characteristics,

Biochemical reactions were identified, but the results often appear later.
Legionella pneumophila has been found in 15 serotypes. Among them, Legionella pneumophila serotype 1 (

Lp1) is most closely related to human diseases, followed by serotypes 4 (Lp4) and 6

(Lp6). About the diagnostic serum used for the serum agglutination method, Tianjin Biochip is recommended

Legionella pneumophila production of a full set of diagnostic serum products.
3. Specimens can be fluorescently labeled with a fluorescent direct fluorescence test, both special

Different and can make rapid diagnosis.