脑膜炎奈瑟菌血清群A鉴定

广州健仑生物科技有限公司

【储藏条件】

2~8℃避光保存，在标明的有效期内使用。

【有效期】

24个月

【产品名称】

通用名：脑膜炎奈瑟菌诊断血清英文名：antisera for N.meningitidis

【产品说明】

本套血清用于A、B、C、W、X、Y等6个常见血清QUN（serogroup）脑膜炎奈瑟菌的血清群鉴定，将相应血清群脑膜炎奈瑟菌制备灭活抗原，免疫家兔所得，血清产品经免疫吸附去除了非特异性凝集成分，具有效价高，特异性强的特点。

脑膜炎奈瑟菌血清群A鉴定

【规格】

每种血清群1瓶，每瓶2ml，均为使用液。

【使用方法】

1.产品在使用前，由冰箱拿出，恢复温度到室温后使用。

2.样品分离培养物，经镜检和生化鉴定，确定为脑膜炎奈瑟菌后，再进行血清分群检测，如果未能确定为脑膜炎奈瑟菌，不宜直接进行血清凝集检测，以免产生假阳性结果。

3.待鉴定细菌在血平板或巧克力平板上，5% CO₂，培养48小时。

4.用酒精擦拭玻璃片。

5.用蜡笔或防水笔将玻璃片分为8个方格。

6. 在玻片每个方格的下半部分，用移液器加5%的福尔马林溶液（基于生物安全目的）。

7. 用无菌或一次性10μl接种环挑取BAP平板上过夜培养的细菌菌落。

8. 在玻片上将细菌与5%的福尔马林溶液混匀，混匀后的液体应该不透明，在加抗血清前应保持细菌悬液不干燥。

9. 在玻片的上方加10μl血清群特异的抗血清，同时在阴性对照侧加BS或者生理盐水。

10. 缓慢的混合细菌悬液和抗血清，使上部的抗血清和下部的细菌悬液充分混合1-2分钟。不要做旋转晃动，以免不同血清群的血清会相互混合污染。

11.在灯光下，黑暗背景条件下观察结果。1-2分钟内呈2+及以上凝集现象为阳性，1-2分钟内呈现2+以下凝集现象为阴性。如果过了2分钟，才发生的凝集反应按阴性处理。

【凝集反应的强度等级】

当抗血清与细菌接触，会引起凝集反应，使细胞（细菌）凝集或呈簇，细胞（细菌）上清液变得清亮，细胞悬液浓度或使用的抗血清浓度不同，会产生不同的强度的凝集反应，见图示

4+ 所有的细胞都发生凝集，细胞悬液清亮。

3+ 75%的细胞发生凝集，细胞上清略微浑浊不清。

2+ 50%的细胞发生凝集，细胞上清略微浑浊不清。

1+ 25%的细胞发生凝集，细胞上清略微浑浊不清。

+/- 少于25%的细胞发生凝集，可见有颗粒状的成分。

0 没有肉眼可见的凝集，上清悬液浑浊、平滑。

【血清群确定】

1. 1-2分钟内，出现3+或4+凝集为阳性反应（强阳性反应）。对于B群脑膜炎奈瑟菌来说，如果出现2+及以上的凝集则可认为阳性。

2. 阴性反应是+/-、1+ 或 2+（弱凝集）的凝集程度。

3. 当菌株仅与一种抗血清出现凝集，但和生理盐水不凝集时才能鉴定为该种血清型。

4. 如果不能确定血清群，菌株记为不能分群脑膜炎奈瑟菌（NG）。

5. 关于不能分群脑膜炎奈瑟菌（NG）菌株。

6. 在生理盐水中凝集，无论与任何抗血清发生强反应，都应标记为自凝菌。

7. 在生理盐水中不自凝，和多种血清出现凝集，记为NG。

8. 不和生理盐水凝集，也不和任何一个血清凝集也记作NG。

【结果难以判断时解决方案】

脑膜炎奈瑟菌具有可变性（有荚膜与无荚膜，小菌落与大菌落，慢生长与快生长，强凝集与弱凝集），有时候很难清除解释结果，一些建议如下：

1. 挑取同一平板上的另一个细菌克隆进行重复凝集试验。

2. 如果玻片上的结果不明确，将试管中配置悬液，重复该试验。

3. 加20µl抗血清直接涂于玻片上，直接加一环细菌进行混均凝集。

4. 再次培养，第二天进行重新试验。

5. 如果当天的平板上有各种大小不一的菌落，每种菌落再次分离纯培养，第二天每种菌落进行试验。大菌落一般会有比较好的凝集反应，小菌落次之。

6. 如果试验中的问题还是不能解决，应当和对照菌株同时进行试验，确保试剂的正确性。

【血清质量控制】

在对未知的菌落进行血清分群之前，应选用一套脑膜炎奈瑟菌参考菌株（A, B, C, W, X, Y）和一株可分群的脑膜炎奈瑟菌进行质量控制检测。操作步骤：

1. 新购进的每一批次抗血清要用参考菌株进行检测。

2. 半年后重复质量控制检测

3. 如果血清管暴露于超过4℃环境，或者怀疑血清被污染时，也要对血清进行重新的质量控制。

4. 关于血清分群和质量控制，每一批次的抗血清需要使用所有的参考菌株进行实验室验证，记录质量控制验证结果。

【血清质量控制检测结果判读】

1. 通过质量控制检测

与同源性的抗原反应，1-2分钟内，出现3+或 4+程度的凝集；单一血清群的抗血清不与其他血清群的脑膜炎奈瑟菌反应，不与NG菌株凝集反应，盐水不自凝。

2. 分群血清质量控制检测失败

如果抗血清与一种或多种参考菌株凝集反应，或/和NG参考菌株反应，盐水自凝，则血清不能使用。

【其他所需材料】

洁净玻片、生理盐水（0.85%的氯化钠溶液）、5%的福尔马林溶液、接种环或移液器。

【注意事项】

1. 本产品只能作为脑膜炎奈瑟菌血清型判定的辅助方法，zui终的判定需形态学、生化方法和血清学方法共同进行。

 2. 本产品应避免冷冻。反复冻融会使血清产生沉淀。

3. 本产品在保存过程中可能会产生浑浊或沉淀，这并不表示该产品已被污染。离心或者过膜去掉浑浊或沉淀后，可以正常使用。

4. 本产品含有0.1%*作为防腐剂，丢弃时需倒入下水管，并用大量的水冲洗下水管。

广州健仑生物公司提供SSI血清产品，包括沙门氏菌，志贺氏菌，大肠杆菌，肺炎链球菌，嗜血杆菌等。并且提供德国有名血清品牌SiFin的核心血清产品，德国SiFin血清质量好，实验*，已被各高校实验室，研究所列为推荐血清产品！详情可咨询工作人员！

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、流感、A链球菌、合胞病毒、腮病毒、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌、化妆品检测、食品安全检测等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

广州健仑生物长期供应各种违禁品检测试纸、违禁品检测卡、违禁品检测试剂盒、药筛试纸、药筛试剂盒、吗啡检测试剂盒、巴比妥检测试剂盒等。检测范围：吗啡、巴比妥、尼古丁、KET、mamp、MDMA、BZO、THC、MTD、BAR、MDMA、AMP、BUP、PCP、TCA、OXY、MET等等。

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90%左右由病毒引起，细菌感染常继发于病毒感染之后。该病四季

、任何年龄均可发病，通过含有病毒的飞沫、雾滴，或经污染的

用具进行传播。常于机体抵抗力降低时，如受寒、劳累、淋雨等

情况，原已存在或由外界侵入的病毒或/和细菌，迅速生长繁殖，

导致感染。该病预后良好，有自限性，一般5-7天*。常继发支

气管炎、肺炎、副鼻窦炎，少数人可并发急性心肌炎、肾炎、风

湿热等。临床上供选择的抗生素日益增多，耐药菌株亦明显增多

，由于大剂量头孢菌素的应用，导致院内感染特别是假单孢铜绿

杆菌和肠球菌感染日益增多。血清学和分子生物学研究的进展，

使人们对支原体、衣原体感染或军团菌感染的认识有很大提高。

氟喹诺酮类、大环内酯类等已引起人们重视。
无论是下呼吸道感染还是上呼吸道感染，绝大部分是由病毒引起

的，称为：病毒性呼吸道感染。
多种病毒引起的急性呼吸道感染。分病毒性上呼吸道感染和病毒

性下呼吸道感染，前者表现为急性鼻炎、咽炎和喉炎，后者表现

为急性气管炎、支气管炎和肺炎。本类疾病发病率高，人群普遍

易染，小儿、老人、营养不良及患有慢性病者更易患病。以冬春

季发病较多。不少呼吸道传染病如麻疹、风疹等可表现为上呼吸

道感染症状，应注意鉴别上呼吸道感染和下呼吸道感染。
作为儿科的常见病、多发病，呼吸道感染是引起世界范围内5岁以

下儿童死亡的*原因，其临床表现易被认识，但引起呼吸道感

染的病因却很难明确。通过常规方法大约只能明确46%为获得性肺

炎病因，对于病毒引起的下呼吸道感染， 只有40%能明确病毒病

原 。呼吸道合胞病毒、副流感病毒、流感病毒是引起儿童下呼吸

道感染和毛细支气管炎的常见病毒，仍然有超过1/3的病例不能明

确病原。作为儿科的常见病、多发病，呼吸道感染是引起世界范

围内5岁以下儿童死亡的*原因，其临床表现易被认识，但引起

呼吸道感染的病因却很难明确。通过常规方法大约只能明确46%为

获得性肺炎病因，对于病毒引起的下呼吸道感染， 只有40%能明

确病毒病原 。
About 90% caused by the virus, bacterial infection often secondary to viral infection. The disease four seasons

Any age can be sick, through the droplets containing the virus, droplets, or contaminated

Dissemination of appliances. Often in the body to reduce resistance, such as cold, tired, rain and so on

The situation, the virus that originally existed or invaded by the outside world or / and bacteria, rapid growth and reproduction,

Cause infection. The disease prognosis is good, self-limiting, usually 5-7 days recovery. Often secondary support

Bronchitis, pneumonia, sinusitis, a few can be complicated by acute myocarditis, nephritis, wind

Hot and humid. Increasing number of clinically available antibiotics, drug-resistant strains also increased significantly

, Due to the use of high-dose cephalosporins, leading to nosocomial infections especially Pseudomonas

Bacilli and enterococci infections are increasing. Advances in serology and molecular biology,

Make people's understanding of Mycoplasma, Chlamydia infection or Legionella infection has greatly improved.

Fluoroquinolones, macrolides have attracted people's attention.
Whether it is lower respiratory tract infection or upper respiratory tract infection, the vast majority are caused by the virus

Called: viral respiratory tract infection.
A variety of acute respiratory infections caused by the virus. Divided viral upper respiratory tract infection and virus

Lower respiratory tract infection, the former showed acute rhinitis, pharyngitis and laryngitis, the latter performance

For acute bronchitis, bronchitis and pneumonia. The incidence of this disease is high, the crowd is widespread

Easy to dye, children, the elderly, malnutrition and those with chronic diseases are more susceptible. In winter and spring

More seasonal disease. Many respiratory infectious diseases such as measles, rubella can be manifested as breathing

Road infection symptoms, attention should be paid to identify upper respiratory tract infection and lower respiratory tract infection.
As a common pediatric disease, frequently-occurring disease, respiratory infections are caused worldwide 5 years old

The first cause of death in children, its clinical manifestations are easily recognized, but cause respiratory sensation

The cause of the dye is difficult to be clear. Approximay 46% of acquired lungs are defined by conventional methods

The cause of inflammation, only about 40% of the virus caused by lower respiratory tract infection can be clear virus

Original Respiratory syncytial virus, parainfluenza virus, influenza virus is caused by children's lower respiratory tract

Infection and bronchiolitis common viruses, there are still more than 1/3 of the cases can not be understood

Really pathogens. As a common pediatric diseases, frequently-occurring disease, respiratory tract infection is caused by the world

The first cause of death among children under 5 years of age is that their clinical manifestations are known but cause

The cause of respiratory infections is difficult to determine. Only about 46% can be defined by conventional methods

The cause of acquired pneumonia, for the virus caused by lower respiratory tract infection, only 40% of the bright

Indeed virus pathogen.