抗人CD71单抗（T9）
 

 广州健仑生物科技?有限公司 

本司长期供应尼古丁（可替宁）检测试剂盒，其主要品牌包括美国NovaBios、广州健仑、广州创仑等进口产品，国产产品，试剂盒的实验方法是胶体金方法。

我司还有很多违禁品检测、激素检测、疫病类检测、肿瘤标志物检测等抗原抗体原料，还有荧光FITC标记类抗体、各种可标记单抗以及免疫磁珠等等产品以及各种生物原料和质控品等，。

我司还提供其它进口或国产试剂盒：登革热、疟疾、流感、A链球菌、合胞病毒、腮病毒、乙脑、寨卡、黄热病、基孔肯雅热、克锥虫病、违禁品滥用、肺炎球菌、军团菌、化妆品检测、食品安全检测等试剂盒以及日本生研细菌分型诊断血清、德国SiFin诊断血清、丹麦SSI诊断血清等产品。

抗人CD71单抗（T9）

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(1) 10×切口平移缓冲液:  0.5M/L Tris-Cl (pH7.2)；  0.1M/L MgSO4； 10mM/L DTT；  100ug/ml BSA。

(2) 未标记的dNTP原液：除同位素标记的脱氧三磷酸核苷酸外,其余3种分别溶解于50mM/L Tris·Cl (pH7.5)溶液中,浓度为0.3mM/L。

(3) [α-³²P] dCTP或[α-³²P]dATP:400 Ci/mM, 10uCi/ul。

(4)E.coli DNA聚合酶Ⅰ：(4单位/ul)：溶于50ug/ml BSA, 1mM/L DTT, 50%甘油，50mM/L Tris·Cl(pH7.5)中。

(5) DNA酶:1mg/ml。

(6) EDTA :200mM/L (pH8.0)。

       (7) 10M/L NH₄Ac。

实验步骤

(1) 按下列配比混合:

　　　　未标记的dNTP 10ul

　　　　10×切口平移缓冲液 5ul

　　　　待标记的DNA 1ug

　　　　[α-32 P]dCTP或dATP(70uCi) 7ul

　　　　E.coli DNA聚合酶 4单位

　　　　DAN酶 I 1ul

　　　　加水至终体积 50ul

 (2) 置于15℃水浴60分钟。

 (3) 加入5ul EDTA终止反应。

    (4) 反应液中加入醋酸铵,使终浓度为0.5M/L, 加入两倍体积预冷无水乙醇沉淀回收DNA探针。

分子生物研究では、zuiもよく使われる針は2連鎖のDNAの針で、遺伝子の植物のコピー数の鑑定、臨床診断などに広く適用されます。二重鎖DNAプローブの合成方法は主に以下の2種類：ニックトランスレーションとランダムプライマー合成法。
ニックトランスレーション（ニックtranslation）時の二重鎖DNA分子の1本の鎖に生じる切開時、E.coli DNAポリメラーゼⅠばヌクレオチド接続小口のさん'ヒドロキシ末端。またこの酵素を持つからご'→さん』のエキソヌクレアーゼ活性、小口からのご'端除去ヌクレオチド。切り捨てるヌクレオチドで同時に切り口のさん'端を補ってヌクレオチドを切り口に沿ってDNA鎖で移動、放射性のヌクレオチド無放射性の代わりにもともとヌクレオチドは、放射性同位体を混ぜ合成新鎖の中。zui適な切り口並進断片は普通は50-500のヌクレオチド。小口移動反応のいくつかの要因の影響を受けて：（a）制品の比活性次第「α- 32P」dNTPの比活性とテンプレートに置き換え程度ヌクレオチド。（b）DNA酵素の用量やE.coli DNAポリメラーゼⅠの品質に影響を与える産物断片の大きさ。（c）DNAテンプレートの抑制因子の酵素の活性を阻害するようなアガロースので、よく浄化後のDNAを使うべき。

In molecular biology research, the most commonly used probe is double stranded DNA probe, which is widely used in the identification and clinical diagnosis of transgenic plants. There are two main methods for the synthesis of double stranded DNA probes: the incision translation method and the random primer synthesis method.
The incision translational method (nick translation), when incision is generated on a chain of double stranded DNA molecules, E.coli DNA polymerase I can connect nucleotides to the 3'hydroxyl terminus of the incision. At the same time, the enzyme is from 5'to 3' exonuclease activity, can be removed from the 5'terminal nucleotide incision. Due to the cut nucleotide and at the same time the 3'end up incision incision so that the nucleotide, moving along the DNA chain, with the use of radioactive nucleotides instead of non radioactive nucleotides, radioactive isotope incorporation into new chain synthesis. The most suitable incisional translation fragment is generally 50-500 nucleotides. The incision translational reaction is influenced by several factors: the specific activity of (a) products depends on the specific activity of [alpha -32P]dNTP] and the extent of the replacement of the nucleotides in the template. (b) the dosage of DNA enzyme and the quality of E.coli DNA polymerase I affect the size of the product fragment. (c) a inhibitor in the DNA template, such as agarose, inhibits the activity of the enzyme, so a carefully purified DNA should be used.

法物研究中，zui常用之探针即为双钟DNA探针，其博施于转基因物拷贝数之定、事诊等者。双钟DNA探针之合法者有下列两种：切口平移法和随机引合法。
切口平移法（nick translation）当双钟DNA法之一钟上生切口时，王.coli DNA聚合酶Ⅰ则可以核苷酸接切口之三'羟基末。并当嘻有自五→'三'之核酸外切酶活性，能自切口者五'端去核苷酸。由于遂核苷酸者又在切口之三'端补上核苷酸，使切口循DNA钟动，以放射性核苷酸代本无放射性之核苷酸，将放射性同位素搀入新执中合而为。zui宜之切口平移片段常为50-500一核苷酸。切口平移应受数也者：（“）物之比活性在[α二32P ] dNTP之比活性与楷中核苷酸被换也。（卜人）DNA嘻之与通用.coli DNA聚合酶Ⅰ之苦伤物之大小片段。（。DNA楷中之抑制物如琼脂糖当抑嘻之活性，故宜用熟化后之DNA。