甲型H1N1（2009）核酸检测试剂盒

广州健仑生物科技有限公司

产品规格：50T/盒；

 保存条件：避光 -20度 保存。

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甲型H1N1（2009）核酸检测试剂盒

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组织培养嘅单层细胞可用匀浆缓冲液裂解，都可直头喺SDS凝胶加样缓冲液中裂解；制备好嘅样品用做SDS- PAGE分析。
2）电泳按常规方法进行SDS-PAGE。
2.蛋白质由凝胶转移到NC膜上（半干式转移）
1）戥头凝胶：用转膜缓冲液戥头，5min×三次。
2）膜处理：将滤纸同NC膜，一同喺转膜缓冲液中浸泡10min。
3）转膜：
a.转膜装置由下至上依次按阳极碳黑、3层厚滤纸、PVDF尼龙膜、凝胶、3层厚滤纸、阴极碳板嘅顺序放好，滤纸、凝胶、PVDF尼龙膜精确对齐，每一步抹得甩气泡，上责500g重物，将碳板上面多余嘅液体吸干。
b.用支架夹紧上述各层，置电转移槽中，NC膜一侧靠正极，凝胶一侧靠负极。接通电源，40V、约1.5A转移1.5～6h。过咗时间长短依靶蛋白分子量大小嚟较。
c.转移结束后，断开电源将膜拎出，鎅攞对量膜条做免疫印迹。
d.将有蛋白Marker嘅条带染色，放入膜染色液中50s后，喺50%甲醇中多次脱色，至背景清晰，跟住用对蒸水洗，风干夹于两层滤纸中保存，留喺骚咸湿结果作对比。
3.免疫探测包畀转印到膜上嘅靶抗原与*抗体（特异抗体）反应、与酵素标第二抗体（抗抗体）反应，与及用酵素相应嘅底物处理后进行靶蛋白（抗原）信号检测。
1）用0.01mol/L PBS洗膜，5min×三次。
2）加封闭液（5%脱脂奶粉或者2%牛血清白蛋白），浸泡畀转印膜，室温或者37℃（平缓震紧）反应1～3h，以封闭转印膜上啲非特异性蛋白质嘅潜在结合位点，逃过非特异性反应。
3）弃封闭液，用0.01mol/L PBS洗膜，5min×三次，振荡。
4）将封闭好嘅转印膜浸入*抗体溶液（按啱稀释比例，用1/2量0.01mol/L PBS加1/2量封闭液稀释）中，抗体液用量约0.2ml/cm2，37℃反应1～2h或者4℃反应12h以上，保持平缓震紧。阴性对照，以1%BSA取代一抗，其余步骤与实验组相同。
5）弃一抗，用0.01mol/L PBS分别就洗膜，10min×三次，振荡。
6）加辣根过氧化物酵素（HP）偶联二抗溶液〔稀释方法同（4）〕，室温下反应1～2h，保持平缓震紧。
7）弃二抗，用0.01mol/L PBS洗膜，10min×4次，振荡。