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杜什曼利原虫、黑热病快速检测卡

杜什曼利原虫、黑热病快速检测卡

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杜什曼利原虫、黑热病快速检测卡:黑热病又称内脏利什曼病,是杜氏利什曼原虫(黑热病原虫)所引起的慢性地方性传染病。

  • 产品描述

 

杜什曼利原虫、黑热病快速检测卡

广州健仑生物科技有限公司

预期使用

    该检测条用于诊断内脏利什曼病,利用快速的免疫层析法在人血清中定性检测杜氏利什曼原虫(L. donovani)抗体。该实验有助于诊断内脏利什曼病(VL)。并只用于体外诊断。

实验原理

  该检测条的硝化纤维膜在实验区包被了rK39,在质控区包被了鸡抗蛋白A。在实验中,血清样本与胶体金共轭物(胶体金标记的蛋白A)反应,而胶体金共轭物预先包被在检测条上。混合物在毛细管作用下沿着硝化纤维膜移动,然后与重组的VL抗原反应,并生成一条红色带。如果存在该红色带表明阳性结果,反之则为阴性结果。混合物继续移动,到达固化的鸡抗蛋白A区(质控区),会在质控区生成一条红色带。质控区红色带的出现说明样本体积充足、液体流动适宜和作为对试剂的质控。

保存方法

    该密封袋或者瓶中含实验检测条应保存在2028℃(室温)直至有效期。瓶中含捕获缓冲液也应保存在2028℃。暴露在超过30℃温度下会影响实验性能,所以应尽量避免。检测条不应冰冻保存。从密封袋中取出后应在1小时内使用,避免受湿度影响。

血清的采集

1该实验中应使用人血清。全血样本不应采用,因为过度的背景可能会影响正确读取实验带。应使用缓冲液稀释血清,避免直接开始实验。阳性血清应使用阴性血清进行稀释。

经凝血后离心分离血清,尽量避免溶血。

应在采集血清后尽快开展实验。血清不能长时间存放在室温下。血清于2-8℃可保存3天。否则血清应保存在20℃以下。

实验前血清平衡至室温。冰冻的血清必须充分融解。血清避免反复冻融。

如果血清需要运输,其包装应该符合联邦的传染源运输法规。

试剂盒成分

该黑热病快速检测条的硝化纤维膜在实验区包被了重组的rK39,在质控区包被了鸡抗蛋白A。试剂盒的成分如下:

125份的独立包装检测条或者25份检测条于一个含干燥剂瓶子中。

21瓶的捕获缓冲液

实验步骤杜什曼利原虫、黑热病快速检测卡

实验前让血清平衡至室温。

从密封袋或瓶中取出黑热病快速检测条

在检测条箭头下方加入20 ul的血清。

将检测条置于实验管中,或者96孔的组织培养板的微孔中,根据检测条上的箭头,其末端应该朝下。

加入2-3滴(150ul)的捕获缓冲液

10分钟内读取结果。在读取结果前,背景的清晰是十分重要的。尤其是当样本为低滴度的抗利什曼原虫抗体时,就只有一条很弱的色带出现在实验区(T)。10分钟后读取可能会导致错误结果。

注意:不要只是加入捕获缓冲液进行实验。必须首先加入20ul的血清。

      如果在加入捕获缓冲液后的10-15秒并没有观察到胶体金的移动,可轻轻压检测条上的样本加入区,直到观察到胶体金的移动。

结果解释

阳性结果

实验阳性则质控带和实验带均出现,如图1。阳性结果表明检测到杜氏利什曼原虫抗体。一条微弱的色带也为阳性结果。作为解释指南,实验区的红色带的颜色强度与抗利什曼原虫抗体浓度相关。实验带为“弱阳性”血清样本,实验结果可能为弱阳性红色带与红点之间,几乎为白色背景(“弱阳性”样本则含有对重组抗原低亲和力或者低滴度抗体)。

阴性结果

实验为阴性,则只有质控带出现。一个阴性结果表明无检测到杜氏利什曼原虫抗体。没有出现实验带,如图2

无效结果

则无出现质控带也没有出现实验带。如果没有出现质控带该实验也无效,即使出现了实验带。建议使用新的检测条和新血清再次进行实验。

注意:实验区的红色带的变化是依赖于抗利什曼原虫抗体浓度。然而,该实验不能检测抗体的定量值和增加的百分比。

预期值:

在流行的地区,该黑热病快速检测条灵敏度为90%或更高。而特异性可能因不能地区而不同。例如在印度104名健康人中超过13名为阳性反应。

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临床表现
根据病因和病变范围的不同,临床表现可有不同的类型:
1.普通感冒
俗称“伤风”,又称急性鼻炎或上呼吸道卡他,多由鼻病毒引起,其次为冠状病毒、呼吸道合胞病毒、埃可病毒、柯萨奇病毒等引起。
起病较急,潜伏期1~3天不等,随病毒而异,肠病毒较短,腺病毒、呼吸道合胞病毒等较长。主要表现为鼻部症状,如喷嚏、鼻塞、流清水样鼻涕,也可表现为咳嗽、咽干、咽痒或灼热感,甚至鼻后滴漏感。发病同时或数小时后可有喷嚏、鼻塞、流清水样鼻涕等症状。2~3天后鼻涕变稠,常伴咽痛、流泪、味觉减退、呼吸不畅、声嘶等。一般无发热及全身症状,或仅有低热、不适、轻度畏寒、头痛。体检可见鼻腔黏膜充血、水肿、有分泌物,咽部轻度充血。
并发咽鼓管炎时可有听力减退等症状。脓性痰或严重的下呼吸道症状提示合并鼻病毒以外的病毒感染或继发细菌性感染。如无并发症,5~7天可*。
2.急性病毒性咽炎或喉炎
(1)急性病毒性咽炎 多由鼻病毒、腺病毒以及肠道病毒、呼吸道合胞病毒等引起。临床特征为咽部发痒或灼热感,咳嗽少见,咽痛不明显。当吞咽疼痛时,常提示有链球菌感染。腺病毒等感染时可有发热和乏力。腺病毒咽炎可伴有眼结合膜炎。体检咽部明显充血水肿,颌下淋巴结肿大且触痛。

 

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